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凱氏定氮法測定飼料中蛋白質(zhì)含量
海能儀器
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儀器與試劑儀器
K1160 全自動(dòng)凱氏定氮儀,SH420F 石墨消解儀
試劑
硫酸滴定液c(H+)=0.1mol /L、2%硼酸溶液:質(zhì)量分?jǐn)?shù)、40%氫氧化鈉溶液、溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑、催化劑片等。
實(shí)驗(yàn)方法樣品制備
取樣品適量用粉碎機(jī)打碎且混合均勻。
實(shí)驗(yàn)過程
稱取制備好的樣品約0.2-0.5g(精確至0.1mg),用稱量紙包好后一并投入消化管中,加一片催化劑片(或者3g硫酸鉀、0.2g硫酸銅),加入10mL濃硫酸。
利用石墨消解爐進(jìn)行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),
設(shè)定消解溫度參數(shù)如下表:
溫度(℃) | 時(shí)間(min) | |
1 | 200 | 15 |
2 | 420 | 90-120 |
消化完畢后,將消化管取下冷卻。待消化管內(nèi)溶液冷卻至室溫后,將消化管放置于定氮儀上,開始蒸餾滴定。定氮儀設(shè)置程序如下:
硼酸 | 稀釋水 | 堿液 | 蒸餾量 | 蒸汽流量 |
25ml | 20ml | 40ml | 300s | 100% |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果儀器自動(dòng)滴定并計(jì)算,計(jì)算公式如下。
式中:c-標(biāo)準(zhǔn)酸摩爾濃度(mol/L)
W-樣品質(zhì)量(g)
V0-空白樣滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(mL)
V-樣品滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(mL),精確到小數(shù)點(diǎn)后四位
f-蛋白質(zhì)系數(shù)
①紅魚粉(蛋白轉(zhuǎn)換系數(shù)6.25)
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