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凱氏定氮法測定奶制品中蛋白質(zhì)含量
海能儀器
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實(shí)驗(yàn)原理奶制品中的有機(jī)態(tài)氮在濃硫酸和催化劑的共同作用下,轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮。加堿蒸餾,使氨析出,用硼酸吸收后,再以鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液進(jìn)行滴定。
儀器與設(shè)備K1100F 全自動(dòng)凱氏定氮儀 SH 420F 石墨消解儀
試劑與耗材實(shí)驗(yàn)中涉及到的試劑,均為優(yōu)級(jí)純或分析純;實(shí)驗(yàn)用水為無氨蒸餾水。
鹽酸或硫酸溶液:c(H + )= 0 . 1mol /L ,標(biāo)準(zhǔn)滴定液。
硼酸溶液:質(zhì)量分?jǐn)?shù) 2% 。
氫氧化鈉溶液:質(zhì)量分?jǐn)?shù) 40% 。
溴甲酚綠 - 甲基紅混合指示劑:將溴甲酚綠乙醇溶液 (1g/ L) 與甲基紅乙醇溶液(1g/ L) 按 5 : 1 體積比臨時(shí)混合搖勻備用。
催化劑片: 3g 硫酸鉀和 0. 2g 硫酸銅混合均勻壓片
實(shí)驗(yàn)過程取樣
準(zhǔn)確稱量2-3g 的樣品(精確至 0 . 1mg ),加催化劑一片(或硫酸鉀 5g 與硫酸銅 0 . 5g) ,再沿瓶壁滴加硫酸 8.5mL 。
消解
利用石墨消解爐進(jìn)行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),設(shè)定消解溫度參數(shù)如下表:
溫度(℃) | 時(shí)間(min) | |
1 | 200 | 20 |
2 | 300 | 20 |
3 | 420 | 90 |
消化完畢后,將消化管取下冷卻。
上機(jī)測試
待消化管內(nèi)溶液冷卻至室溫后,將消化管放置于定氮儀上,開始蒸餾滴定。儀器自動(dòng)滴定并計(jì)算結(jié)果
式中:M-標(biāo)準(zhǔn)酸摩爾濃度(mol/L)
W-樣品質(zhì)量(g)
V0-空白樣滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(mL)
V-樣品滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(mL)
6.38-樣品蛋白系數(shù)
結(jié)果與討論
1 | 2.0092g | 7.7740ml | 3.4671% | 3.4649% |
2 | 2.1544g | 9.3102ml | 3.4627% | |
原味酸奶 | ||||
1 | 2.5682g | 9.8080ml | 3.4420% | 3.4610% |
2 | 2.9722g | 11.4404ml | 3.4800% | |
高鈣酸牛奶 | ||||
1 | 1.9236g | 7.1374ml | 3.3165% | 3.3190% |
2 | 1.9568g | 7.2674ml | 3.3214% |
使用凱氏定氮儀測試奶制品中蛋白質(zhì)含量,結(jié)果準(zhǔn)確,平行性良好。
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